免疫・膠原病 研究紹介

研究テーマ

  1. 関節リウマチと抗CCP抗体の真の抗原探索(大学院生、津田玲奈) 
  2. 膠原病関連間質性肺炎における自己抗体の関与(大学院生、奥村麻衣子) 
  3. Sirt1が関節炎発症に及ぼす影響(科学研究費 若手研究B、研究課題番号:25860807、朴木博幸)
  4. 関節炎モデルマウスにおけるCD206陽性M2マクロファージの役割の検討(科学研究費、基盤研究C、研究課題番号:15K09523、篠田晃一郎)

研究詳細

  1. 関節リウマチと抗CCP抗体の真の抗原探索(大学院生、津田玲奈)

    <研究のあらまし>

    関節リウマチは、何らかの原因により体の中で異常な免疫反応が起こり関節に炎症を起こす病気です。
    多くの関節リウマチの方の血液中には抗CCP抗体(抗環状シトルリン化ペプチド抗体)という自己抗体があって、これが関節リウマチの発病と深く関わっていることがわかっています。
    この抗CCP抗体には、相手となる抗原というものが体の中に存在しています。しかし、この抗CCP抗体の相手である抗原(タンパク質)が、何なのかということについては、まだあまりよく分かっていませんでした。
    そこで私たちは、抗CCP抗体陽性の患者さんの血液中のリンパ球(白血球の一種)から、抗CCP抗体を作る細胞を取り出して、どのようなタンパク質と結合するのかを調べてみました。

<実験の流れ>
  • (1)抗体の取得:患者さんのリンパ球から、抗CCP抗体を産生しているリンパ球だけを回収し、抗CCP抗体の遺伝子DNAを取り出します。
  • (2)エピトープの探索:あらかじめ抗CP抗体と結合することがわかっている人工タンパクのアミノ酸配列を使って、特にどの部分のアミノ酸が抗体との結合に重要なのかを調べました。この結合に必須の配列をエピトープと呼びます。
  • (3)タンパクの検索と合成:探索したエピトープに似た配列を持つタンパク質をデータベースで検索しました。それらのうち作製可能な数種類のタンパク質を選び、人工的に合成しました。
  • (4)抗原と抗体の結合の確認:合成したタンパク質をシトルリン化し、精製した抗CCP抗体と結合するかをELISA法、ウエスタンブロット法という検査法を用いて確認しました。
<研究の結果>

今回患者さんのリンパ球から取り出した抗CCP抗体は、人間の体の中にもともと存在するタンパク質だけでなく、広く自然界に存在する細菌、ウイルス、真菌(カビ)、植物などのさまざまな生物に含まれるタンパク質と結合することがわかりました。実際に実験で確認したのは20種類程度ですが、似たような並び方をしたタンパク質はデータベースで調べたところ3000種以上あり、おそらく同じように抗原となることが予想されています。
この結果は、「自然界に存在する様々なものが鼻や口などから体の中に入り、それらが体の中でシトルリン化という変化を受けて抗原となり、抗CCP抗体が作られる引き金となることで関節リウマチの発病を誘導している」可能性を示しています。
なお、この研究成果は、Arthritis and Rheumatology (IF7.871)へアクセプトされました(http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/art.39161/abstract)。

  1. 膠原病関連間質性肺炎における自己抗体の関与(大学院生、奥村麻衣子)
    現在進行中。

  2. Sirt1が関節炎発症に及ぼす影響
    関節リウマチは持続的な関節局所の慢性炎症により疼痛や関節構造の破壊を引き起こし、生活の質の低下や平均寿命の短縮をきたします。
    中でも関節滑膜局所にいる白血球の一種であるマクロファージは種々の炎症性の物質を産生し、さらに破骨細胞への分化誘導刺激を受け関節局所の構造破壊の主たる原因となります。
    Sirt1 遺伝子は個体では長寿遺伝子として働きますが、マクロファージに対しては炎症を抑える方向に働くとれます。そこで我々はマクロファージ特異的にSirt1遺伝子が欠損したマウス(ノックアウトマウス)と正常なマウス(野生型マウス)を用いて、関節リウマチの骨破壊に重要な役割を果たす破骨細胞の分化誘導に関して検討することを着想しました。
  3. リウマチ・膠原病研究紹介(図1)

    その結果、図1の如く野生型と比べ、ノックアウトマウスからの方が破骨細胞はより多く分化誘導されました。
    このことからSirt1遺伝子の機能が欠損、ないしは低下すると、関節破壊に重要な役割を果たす破骨細胞が増加し、結果として関節リウマチの骨破壊が進行する可能性が示唆されました。


  4. 関節炎モデルマウスにおけるCD206陽性M2マクロファージの役割の検討
    現在進行中。

主な免疫・膠原病グループの研究業績(2016)

学会報告

  1. 松井 篤,朴木博幸,山口智史,篠田晃一郎,多喜博文.汎血球減少を併発したIgG4関連疾患の一例.第113回日本内科学会総会・講演会「医学生・研修医の日本内科学会ことはじめ2016東京」;2016 Apr 16;東京.
  2. 篠田晃一郎,多喜博文,朴木博幸,津田玲奈,小尾麻衣子,山口智史,松井 篤,木戸敏喜,戸邉一之.抗aminoacyl tRANA合成酵素抗体測定方法(RNA-免疫沈降法、ユーロラインMyostis profile 3、anti-ARSテスト)の比較検討.第60回日本リウマチ学会総会・学術集会;2016 Apr 21-23;横浜.
  3. 朴木博幸,篠田晃一郎,木戸敏喜,松井 篤,山口智史,小尾麻衣子,津田玲奈,多喜博文,戸邉一之.FDG-PETを利用した大型血管炎の病変の局在の評価に関する検討.第60回日本リウマチ学会総会・学術集会;2016 Apr 21-23;横浜.
  4. 津田玲奈,小尾麻衣子,木戸敏喜,松井 篤,山口智史,朴木博幸,篠田晃一郎,多喜博文,村口 篤,戸邉一之.関節リウマチ患者由来のモノクローナルACPAは多数のシトルリン化タンパク質と結合する.第60回日本リウマチ学会総会・学術集会;2016 Apr 21-23;横浜.
  5. 山口智史,朴木博幸,木戸敏喜,松井 篤,小尾麻衣子,津田玲奈,篠田晃一郎,多喜博文,戸邉一之.膠原病の経過中にKL-6高値をきたした悪性腫瘍の4症例.第60回日本リウマチ学会総会・学術集会;2016 Apr 21-23;横浜.
  6. 小尾麻衣子,津田玲奈,朴木博幸,篠田晃一郎,多喜博文,戸邉一之,村口 篤.膠原病関連間質性肺炎を有する患者から単離したモノクローナル抗TRIM21/Ro52抗体を用いたエピトープ検索および組織との反応性の検討.第60回日本リウマチ学会総会・学術集会;2016 Apr 21-23;横浜.
  7. 松井 篤,篠田晃一郎,木戸敏喜,小尾麻衣子,山口智史,津田玲奈,朴木博幸,多喜博文.ニューモシスチス肺炎(PCP)予防に関するスルダメトキサゾール/トリメトプリム(ST)合剤の減量投与の効果と安全性.第60回日本リウマチ学会総会・学術集会;2016 Apr 21-23;横浜.
  8. 木戸敏喜.PR3-ANCA陽性を示し潰瘍性大腸炎と肥厚性硬膜炎を合併した1例.第60回日本リウマチ学会総会・学術集会(ポスター発表);2016 Apr 21-23;横浜.
  9. 浅野諒子,朴木博幸,木戸敏喜,松井 篤,山口智史,小尾麻衣子,津田玲奈,篠田晃一郎,多喜博文,戸邉一之.汎血球減少及び咽頭潰瘍をきたしたIgG4関連疾患の1症例.第60回日本リウマチ学会総会・学術集会(ポスター発表);2016 Apr 21-23;横浜.
  10. 松下 功,元村 拓,多喜博文,川野充弘,山田和徳,村山隆司,中﨑 聡,高木治樹,勝木保夫,木村友厚.関節リウマチにおけるアバタセプトの小関節および大関節破壊抑制効果-他施設共同研究におけるMTX併用の有無による比較検討-.第60回日本リウマチ学会総会・学術集会;2016 Apr 21-23;横浜.
  11. 朴木博幸,篠田晃一郎,浅野諒子,木戸敏喜,松井 篤,小尾麻衣子,津田玲奈,多喜博文,戸邉一之.不明熱、不明炎症の精査を契機に発見された前立腺癌の多発骨転移の1例.第28回中部リウマチ学会;2016 Sep 2-3;福井.
  12. 松井 篤,朴木博幸,浅野諒子,木戸敏喜,篠田晃一郎,多喜博文.リツキシマブにより救命しえた劇症型抗リン脂質抗体症候群の一例.第28回中部リウマチ学会;2016 Sep 2-3;福井.
  13. 木戸敏喜,浅野諒子,松井 篤,朴木博幸,小尾麻衣子,津田玲奈,篠田晃一郎,多喜博文,戸邉一之.ブドウ球菌による毒素性ショック症候群後、IgA血管炎を発症した1例.第28回中部リウマチ学会;2016 Sep 2-3;福井.
  14. 浅野諒子,朴木博幸,木戸敏喜,松井 篤,小尾麻衣子,津田玲奈,篠田晃一郎,多喜博文,戸邉一之.無菌性髄膜炎を来した混合性結合組織病の1症例.第28回中部リウマチ学会;2016 Sep 2-3;福井.
  15. 松下 功,元村 拓,多喜博文,川野充弘,山田和徳,村山隆司,中﨑 聡,高木治樹,勝木保夫,木村友厚.高齢RA患者に対するゴリムマブの有効性と安全性-FIT-RA registryを用いた解析-.第31回日本臨床リウマチ学会;2016 Oct 29-30;東京.
  16. Okumura M, Ozawa T, Taki H, Kishi H, Muraguchi A. Epitopes and tissue reactivity of monoclonal anti-TRIM21/Ro52 autoantibodies isolated from collagen disease-patients with interstitial lung disease. 日本免疫学会総会・学術集会(ポスター発表);2016 Dec 5-7;沖縄.

その他の研究業績はこちら>>



PAGE TOP